葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(浅易微板法)

产品简介：

葡糖-6-磷酸脱氢酶( glucose 6-phosphatedehydrogenase，G-6-PD 或 G6PD)是糖酵解途径、柠檬酸循环以外的另一个葡萄糖剖析途径的磷酸葡萄糖酸途径(磷酸戊糖途径)中

的*个酶(EC1.1.1.49)。

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)检测试剂盒(简易比色法)其检测原理是红细胞 G-6-PD 催化葡萄糖-6-磷酸葡萄糖-内酯，后者很快氧化成 6-磷酸葡萄糖酸(6-PGA)，同时 NAPD 被还原成 NADPH，其反应公式如下：

G-6-P+NAPD+  →6-PGA+L-NADPH。

在上述偶联反应中，NADPH 天生速率与样本中酶活性呈反比，通过酶标仪或自劢剖析

仪在 340nm 处检测吸光度降低速率( A/min)，降低速率( A/min)与 G-6-PD 活性呈正，间接计算酶的活性单位。100T 该试剂盒试剂可以检测 50 次样本，该试剂盒仅用于科研领

域，不宜用于临床诊断或其他用处。

产品构成：

自备质料：

1、心理盐水

2、水浴锅

3、96 孔板

4、酶标仪

操纵步调(仅供参考)：

1、准备溶血液：取新鲜抗凝血，离心取上清及白细胞层，用 4℃预冷的心理盐水洗涤 2 次，

每次取上清时，务必去除剩余的白细胞层，再加预冷的心理盐水配成含红细胞压积为

30%的红细胞悬液，4℃保管备用。临用前，以样本稀释液稀释 25 倍，即为溶血液。4℃

保管 10h，-20℃保管 48h。

2、配制 NADP 储存液：取 9mg NADP 消融于 1ml G6PD assay buffer，充实混匀，配制

成 NADP 储存液(9mg/ml)，-20℃保管备用。

3、配制检测事情液：取 NADP 储存液和 G6PD assay buffer，按 NADP 储存液(9mg/ml)：

G6PD assay buffer=1：49 的比例混淆，即为检测事情液。-20℃保管，一个月无效。4、配制 G-6-P 事情液：取 G-6-P 1 支消融于 G-6-P 稀释液 10ml，混匀，即为 G-6-P 工

作液，分装成小份后，-20℃保管备用。

5、分光光度计检测：依照下表设置空缺管、测定管，溶液应依照顺序顺次参加，并留意制止产气愤泡。假如样品中的酶活性过高，可以增加样品用量或得当稀释后再进行测定。

混匀，37℃孵育 60s，在 340nm 处 1-3min 各管吸光度

变化，计算各管  A/min。

6、生化剖析仪检测：依照下表设置次要参数。假如样品中的酶活性过高，可以增加样品用

盘算：

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   分光光度计计算公式：G6PD(U/L)= A/min×(10 /6220)×(250/5)= A/min×8040

式中：6220=NADH 的吸光度250=反应液的总体积(μl) 5=待测样品体积(μl)

生化剖析仪计算公式：G6PD(U/L)= A/min×(10 /6220)×(303/6)= A/min×8040

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式中：  A/min=测定的 340nm 吸光度的降低速率

6220=NADH 的吸光度303=反应液的总体积(μl) 6=待测样品体积(μl)

参考范畴：

成年安康人红细胞 G6PD：8-18U/g Hb

留意事变：

1、 血清中 G6PD 活性在室温可以保管 2 天，4℃保管 1 周，-20℃保管 1 个月。

2、 严重黄疸、脂血或溶血的血清，大概会惹起测定管吸光度增高。

3、 为了您的宁静和安康，请穿实行服并戴一次性手套操纵。

无效期：6 个月无效。