CCK-8试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实行(ELISA).已知浓度的尺度品、未知浓度的样品参加微孔酶标板内举行检测。先将生物素标志的抗体同时温育。洗濯后，参加亲和素标志过的HRP。再颠末温育和洗濯，去除未联合的酶联合物，然后参加底物A、B，和酶联合物同时作用。发生颜色。颜色的深浅和样品中的浓度呈比例干系。

　　CCK-8试剂盒的操纵步调：

　　1、配制琼脂糖EB凝胶,电泳以分散DNA片断。任何范例或品级的琼脂糖都可以利用。

　　九游会激烈的保举利用奇怪的TAE/TBE电泳缓冲液。不要反复利用电泳缓冲液，旧的电泳缓冲液PH会增长而低落DNA的接纳产量;

　　2、电泳充足工夫后，在紫外灯下警惕地把所需的DNA的片断切上去。并只管即便去除多余的凝胶。

　　留意:DNA在紫外灯下的曝光的工夫不要凌驾30秒，同时在紫外灯下操纵的时分肯定要戴掩护眼镜。

　　3、称取空离心管的分量，切下带目标片断的凝胶装在1.5ml离心管中并称其分量，求出凝胶块的分量，类似地确定其体积。一样平常状况下，凝胶的密度为1g/ml，于是凝胶的体积与分量的干系可按上面换算:凝胶薄片的分量为0.2g则其体积为0.2ml;参加等倍凝胶体积的BindingBuffer，把混淆物置于55℃~65℃水浴中温浴7min至凝胶*消融，其间每隔2-3分钟混匀一次;

　　紧张提示:在凝胶*消融之后，留意凝胶-BindingBuffer混淆物的pH值。假如其pH值大于8的话，DNA的产量将大大增加。察看混淆物的颜色，假如是橙色或白色，则要参加5μl浓度为5M，pH为5.2的醋酸钠，以调低其pH值。颠末这一调治，该混淆物的颜色将规复为正常的浅黄色。一样平常状况下，利用奇怪的电泳缓冲液，凝胶-Bindingbuffer混淆物的PH值的不会降低;

　　4、转移700μl的DNA-琼脂糖溶液到一个HiBindTMDNA柱子，并把柱子装在一个洁净的2ml搜集管内，室温下，10,000×g离心1min，弃去液体。

　　一个HiBindDNA柱子最多可包容700μl的溶液，假如DNA-琼脂糖混淆物的体积大于700μl，可先转移700μl溶液至柱子，离心完后，将余下的溶液持续加上柱子上。但每一个HiBindTM柱子最多可以联合25~30μgDNA。假如预期产量较大，则把样品辨别加到符合数量的柱中。

　　5、将柱子重新套接纳集管中，加300μlBindingBuffer至HiBindDNA柱子中;室温下，10,000×g离心1分钟，去弃滤出液;这一步相称要害，不要疏忽此步。

　　6、将柱子重新套接纳集管中，参加700μlSPWWashbuffer至HiBindDNA柱子中，室温下，10,000×g离心1分钟，去弃滤出液;注:SPWWashbuffer在利用前必需按瓶子标鉴要求用无水乙醇举行浓缩。

　　7、将柱子重新套接纳集管中，反复参加700μlSPWWashbuffer至HiBindDNA柱子中，室温下，10,000×g离心1分钟，去弃滤出液;

　　8、弃去液体，将空柱子重新套接纳集管中，10,000×g离心1min以甩干柱基质剩余的液体。

　　这步可以去除柱子基质上剩余的乙醇，不要省略此步―――对失掉好的DNA产量是非常紧张的。

　　9、把柱子装在一个洁净的1.5ml离心管上，参加30~50μl洗脱液或灭菌水上柱子膜上，10,000×g离心1分钟，离心管中的溶液便是纯化的DNA产品，保管于-20度。