CCK-8试剂盒实行原理和操纵步调详解
Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒，是一种基于WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐），CCK-8试剂盒实用于细胞增殖和细胞毒性的疾速高敏捷度检测试剂盒。
CCK-8试剂盒实行原理：
WST-8属于MTT的晋级产品，在电子耦合试剂存在的状况下，可以被线粒体内的脱氢酶复原天生高度水溶性的橙黄色的甲臜产品（formazan）。颜色的深浅与细胞的增殖成反比，与细胞毒性成正比。利用酶标仪在450mM波优点测定OD值，直接反应活细胞数目。
CCK-8试剂盒用处：
CCK-8法使用十分普遍，如药物挑选、细胞增 殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏实验以及生物因子的活性检测等。
CCK-8试剂盒用于药物挑选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏实验。那么用于细胞毒性测定的操纵步调是什么呢？
办法/步调1:
在96孔板中配制100μl 的细胞悬液。将培育板在培育箱预培育 24 小时 (在 37℃，5% CO2 的条件下)。
办法/步调2:
向培育板参加 10μl 差别浓度的待测物质。
办法/步调3:
将培育板在培育箱孵育一段得当的工夫 (比方: 6,12, 24 或 48 小时)。
办法/步调4:
向每孔参加 10μl CCK8 溶液（Engreen） (留意不要在孔中天生气泡，它们会影响 OD 值的读数)。
办法/步调5:
将培育板在培育箱内孵育 1-4 小时。
办法/步调6:
用酶标仪测定在 450 nm 处的吸光度。
办法/步调7:
假如临时意外定OD值，计划当前测定的话，可以向每孔中参加10μl 0.1 M HCl溶液大概1%w/vSDS 溶液，并遮掩培育板避光保管在室温条件下。在24小时内吸光度不会产生变革。
以上便是CCK-8试剂盒的相干利用阐明，以供参考！
