CW2 人结肠癌细胞

Human Colon Cancer Cells ,CW-2

货号：YJ-h049（STR判定）

代价： 1500.0

规格： 1*10 ⁶

细胞介绍

泉源于结肠癌。CEA阳性，移植于裸鼠可成瘤。

细胞特征

1） 泉源：人结肠癌

2） 形状：上皮细胞样，贴壁生长

3） 含量：>1x10^6  细胞数

4） 规格：T25瓶大概1mL冻存管包装

5)  用处：仅供科研利用。

运输和保管

干冰运输及苏醒好存活细胞

（1）1mL冻存管包装干冰运输，收到后-80度冰箱保管留宿后转入液氮或间接苏醒，若发明干冰已挥发洁净、冻存管瓶盖零落、破坏及细胞有净化，请立刻与九游会联系。

（2）T25瓶苏醒的存活细胞常温发货，收到后依照细胞吸收后的处置办法操纵。

细胞吸收后的处置

1）收到细胞后，75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培育箱安排约2-3h，若发明培育瓶破坏、有液溢出及细胞有净化，请照相后实时联系九游会。

2）请在4或5X显微镜下确认细胞形态，同时给刚收到的细胞照相（10×，20×）各2-3张以及培育瓶表面照片一张保存，作为售后时收到时细胞形态的根据。

3）贴壁细胞：细胞在37℃培育箱中安排2-3h，显微镜下察看细胞的生长和贴壁状况，有些贴壁细胞在快递运送历程中会因振动零落和零落后成团的状况。若镜下察看细胞的生长密度若在60%以下，可去除培育瓶中灌液培育基（如有未贴壁的细胞必要离心接纳，重悬打入到原培育瓶中）,参加新配制的完全培育基6-8mL，放到细胞培育箱中持续培育。若细胞生长密度达70%-80%以上，可以对细胞举行传代处置。传代历程中，若因运输振动零落的细胞必要离心接纳。

4）备注：运输用的培育基（灌液培育基）不克不及再用来培育细胞，请换用依照阐明书细胞培育条件新配制的完全培育基来培育细胞。  收到细胞后第一次传代发起T25培育瓶1：2传代 。

一．培育基及培育冻存条件预备

1） 预备RPMI-1640（保举YJ-0002）培育基；优质胎牛血清，10%；双抗1%,细胞生长比力慢，发起细胞传代每次都是1:2传代。

2） 培育条件： 气相：氛围，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培育箱湿度为70%-80%。

3） 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。

二．细胞处置：

1） 冻存细胞的苏醒：

将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中敏捷摇摆冻结，参加到含4-6mL完全培育基的离心管中混淆匀称。在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，完全培育基重悬细胞。然后将细胞悬液参加含6-8ml完全培育基的培育瓶（或皿）中37℃培育留宿。第二天显微镜下察看细胞生长状况和细胞密度。

2） 细胞传代：假如细胞密度达80%-90%，即可举行传代培育。

关于贴壁细胞传代可以参考以下办法：

1. 弃去培育上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

2. 参加0.25％（w / v）胰卵白酶-0.53 mM EDTA于培育瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培育箱中消化1-2分钟（难消化的细胞可以得当延伸消化工夫），然后在显微镜下察看细胞消化状况，若细胞大局部变圆并零落，敏捷拿回操纵台，小扣几下培育瓶后参加3-4ml含10%FBS的培育基来停止消化。 

3.悄悄打匀后吸出，在1000RPM条件下离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培育液后吹匀。将细胞悬液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml依照阐明书要求设置装备摆设的新的完全培育基以坚持细胞的生长生机，后续传代依据实践状况按1:2~1:5的比例举行。

3）细胞冻存: 收到细胞后发起在培育前3代时冻存一批细胞种子以备后续实行利用。

上面T25瓶为例；

1. 细胞冻存时依照细胞传代的历程搜集消化好的细胞到离心管中，可利用血球计数板计数，来决议细胞的冻存密度。一样平常细胞的保举冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.

2. 1000rpm离心3-5min，去失上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ，按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分派到一个冻存管中将细胞分派到冻存管中，标注好称号、代数、日期等信息。

3. 将要冻存的细胞置于步伐降温盒中，-80度冰箱中留宿，之后转入液氮容器中贮存。同时记载好冻存管在液氮容器中的地位以便后续查阅和利用。

留意事变

1.收到细胞后，若发明干冰已挥发洁净、冻存管瓶盖零落、破坏及细胞有净化，请立刻与九游会联系。

2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培育箱静置2-4小时（视细胞密度而定）波动细胞形态。接着在颠倒显微镜下察看细胞生长状况，并对细胞举行差别倍数照相（发起收细胞时就全体表面拍一张照片，察看培育基的颜色和能否有漏液状况，随后在显微镜下拍下细胞形态，100*，200*各一张），察看记载细胞在运输历程中能否有净化状况。作为我方举行贩卖根据。

3.由于细胞形态受情况、操纵和运输等多方面要素影响，故九游会只包管客户收到细胞后一周内的细胞形态，故客户必要售后时需出示收到细胞的工夫证明及客户提供收货工夫和发明题目后客服职员相同的工夫证明，时期距离工夫不克不及大于7天。

4.一切植物细胞均视为有潜伏的生物危害性，必需在二级生物宁静台内操纵，并请留意防护，一切废液及打仗过此细胞的器皿必要灭菌前方能抛弃。

5.客户在细胞培育历程中，有任何技能题目可以联系技能售后办事，九游会随时赐与解答。

实行代做办事：

针对退职或专职临床研讨生、博士生实行室条件的不齐备、临床事情忙碌科研工夫严峻不敷或地市级三级医院科室主任、主任医师、主治医师等公事忙碌、无精神、工夫查找文献、科研圈子气氛不敷浓重、提升、降职必要。九游会可依据客户研讨偏向、基金标书、实行课题外包目的和要求，实行预算等设计可操纵实行的细致实行方案。